Tumgik
#Brefeldin A
cailynnjohnson · 8 months
Text
Intracellular cytokine flow cytometry
Another elegant, functional approach to detect cytokine production in T-cells is by intracellular cytokine flow cytometry. Following brief antigen exposure, cytokines are trapped intracellularly by the addition of brefeldin A to block the secretory pathways. After permeabilization, specific anti-cytokine fluorescent antibody conjugates can pass into the cells.
0 notes
medicalhealthvn · 4 years
Text
ĐƯƠNG QUY
CHI TIẾT SẢN PHẨM Đương quy là cái tên khá quen thuộc đối với nhiều người, thường được dùng trong các bài thuốc chữa bệnh và là nguyên liệu quan trọng cho các món ăn bồi bổ sức khỏe. Đây là một trong những loại thảo dược quý hiếm nhất trong Đông y và cũng là loại thảo dược được nhiều người săn lùng nhất hiện nay.
Vậy đương quy là gì? Đương quy có tác dụng gì? Cách dùng ra sao? Tại sao lại nhiều người tìm mua đến vậy? Sau đây, mời các bạn cùng caythuoc.vn giải đáp những vấn đề trên để hiểu rõ hơn về vị thuốc đương quy nhé!
duong quy
Đương quy
Đương quy là gì? Đương quy hay còn có tên gọi khác là tần quy, vân quy hay sâm đương quy, có tên khoa học là Angelica sinensis, thuộc họ Hoa tán Apraceae. Sâm đương quy là thảo được được dùng trong nhiều đơn thuốc bổ để điều trị bệnh và đứng đầu trong các vị thuốc chữa bệnh ở chị em phụ nữ. Đó cũng là lý do mà nhiều người ưu ái gọi nó là “Nhân sâm dành cho phụ nữ”, rất được tin dùng hiện nay.
Đặc điểm của đương quy Đương quy có mùi thơm đặc biệt, là cây thảo sống lâu năm, có chiều cao trung bình từ 40cm – 1m. Thân đương quy hình trụ, màu tím, có rãnh dọc. Lá đương quy mọc so le, có dạng lá kép xẻ 3 lần lông chim, cuống lá dài, có bẹ ôm lấy thân, mép lá chia thùy và răng cưa không đều.
cay duong quy
Cây đương quy
Hoa đương quy mọc hợp thành cụm hoa hình tán kép, màu trắng xanh, mỗi cụm sẽ có tầm 10-30 hoa và thường nở vào tháng 7, 8. Còn quả đương quy thì có rìa màu tím nhạt, quả nhỏ, kết trái sau mùa hoa.
Nguồn gốc của đương quy Đương quy là vị thuốc quý có nguồn gốc từ Trung Quốc, chúng thường phát triển ở những vùng núi cao có độ cao từ 2000-3000m với khí hậu ẩm mát. Bên cạnh đó, Triều Tiên cũng là quốc gia có điều kiện khí hậu thích hợp với loại thảo dược này nên cũng được phát triển khá nhiều.
Ở Việt Nam, củ đương quy được du nhập từ nước ngoài về trồng từ những năm 1960 nhưng sinh trưởng không được mạnh cho lắm. Lúc mới du nhập về, chỉ có Sapa là có điều kiện tốt để loại cây này phát triển và một số ít ở các vùng xung quanh Hà Nội.
Ngày nay, nhờ kỹ thuật trồng trọt tiến tiến, vị thuốc này đã được trồng ở nhiều tỉnh vùng núi Tây Bắc như Lào Cai, Lai Châu, Hòa Bình và một số tỉnh ở Tây Nguyên như Lâm Đồng, Đăk Lăk.
Xem thêm: NẤM LINH CHI: CÔNG DỤNG, CÁCH SỬ DỤNG, GIÁ BÁN, MUA Ở ĐÂU TP HCM?
Cách trồng đương quy duong quy tuoi
Củ đương quy tươi
Người ta chủ yếu trồng cây đương quy bằng cách gieo hạt, hạt đương quy phải để giống ở các vùng núi cao, có khí hậu mát lạnh thì khi gieo mới thu được loại dược liệu tốt. Trước khi gieo phải xử lý hạt, ngâm hạt giống trong nước ấm 40 độ C trong 2 giờ rồi vớt hạt trộn với cát khô.
Tiếp đến, đổ vào một tấm vải, đặt trong cái rổ rồi dùng tấm vải khác đậy lên, tưới đẫm nước mỗi ngày, treo rổ lên cho nó thoát nước. Sau 10 ngày, lấy ra trộn với tro khô là có thể đem đi gieo.
Bộ phận dùng và thu hái đương quy Bộ phận dùng: Bộ phận dùng làm thuốc của đương quy là phần củ và rễ cây.
hinh anh cay duong quy
Hình ảnh cây đương quy
Thu hái: Người ta thường thu hái đương quy vào mùa thu của năm thứ 4 sau khi gieo hạt, tức vào khoảng tháng 9, 10. Lúc này, họ sẽ đào phần củ và rễ của đương quy về để sơ chế làm thuốc. Cây có tuổi thọ càng lâu thì dược tính càng tốt đối với việc chữa bệnh và bồi bổ sức khỏe.
Cách sơ chế đương quy thành thuốc Sau khi thu hái củ đương quy về, đem rửa sạch loại bỏ bụi bẩn, đất cát Cắt bỏ phần rễ con xung quanh Đêm phơi trong bóng râm hoặc sấy lửa nhẹ cho khô rồi cho vào túi nilong cột kín miệng, bảo quản nơi khô ráo, độ ẩm không quá 15%. duong quy kho
Đương quy khô
Tính vị của đương quy Theo y học cổ truyền, đương quy là vị thuốc có tính ấm, vị ngọt, hơi cay có tác dụng bổ huyết hoạt huyết, nhuận táo hoạt trường, điều huyết thông kinh. Đương quy chủ trị các bệnh thai tiền sản hậu, đau tê chân tay, tổn thương do té ngã, tâm can huyết hư và trị nhọt lở loét, khái suyễn.
Thành phần hóa học của đương quy Đương quy có hàm lượng tinh dầu chiếm đến 0,26%, trong đó có 40% là các acid tự do. Đây cũng là thành phần hóa học chính quyết định nên tác dụng chữa bệnh của đương quy.
Bên cạnh tinh dầu, củ đương quy còn có các hợp chất khác như courmarin, polyacetylen, polysachrid, sacharid, brefeldin, acid amin, sterol…
duong quy
Đương quy thái lát
Ngoài ra, đương quy còn có chứa nhiều loại vitamin và một số nguyên tố vi lượng khác tốt cho sức khỏe chẳng hạn như vitamin B12, A, B, E, đồng, canxi, kẽm, nhôm, magie, crom, …
Đương quy trị bệnh gì? Trong đương quy có chứa nhiều tinh dầu, vị cay, ngọt và ấm. Đem lại nhiều công dụng chữa bệnh như sau:
Tác dụng của sâm đương quy cực kỳ tốt cho phụ nữ. Chữa bệnh thiếu máu, giúp bổ huyết. Uống nước đương quy trị được đau bụng sau sinh đẻ. Tác dụng của sâm đương quy giúp tăng tế bào máu, trị người mất sức, mệt mỏi. Trị bế kinh, đau bụng kinh. Máu kinh ứ đọng không chảy ra được làm cơ thể phát sốt, mệt mỏi xanh xao Trị bệnh ra mồ hôi trộm. Tác dụng sâm đương quy trị bệnh đau cột sống. Đương quy trị bệnh viêm tiền liệt tuyến. duong quy tri benh gi
Đương quy lâu năm
Đương quy có tác dụng gì? Công dụng của đương quy Đương quy là vị thuốc quý hàng đầu trong Đông y rất được nhiều người tìm mua và tin dùng. Không chỉ có tác dụng điều trị được nhiều loại bệnh nguy hiểm qua các bài thuốc, đương quy còn có thể được kết hợp trong các món ăn bổ dưỡng giúp bồi bổ cơ thể, tăng cường các chức năng miễn dịch và bảo vệ sức khỏe toàn diện. Dưới đây là 10 công dụng chữa bệnh nổi bật nhất của đương quy và các bài thuốc kèm theo mà bạn nên biết.
Đương quy có tác dụng chữa suy nhược cơ thể, thiếu máu Chuẩn bị: 16g đương quy, 12g thục địa, 8g bạch thược, 6g xuyên khung
Cách dùng: Cho tất cả các vị thuốc này vào ấm sắc chung với 800ml nước đến khi còn 300ml thì ngưng, chia làm 3 lần uống trong ngày.
Đương quy có tác dụng chữa rong kinh hay sảy thai ra máu Chuẩn bị: đương quy, sinh địa mỗi vị 12g; 16g bạch thược; xuyên khung, a giao, cam thảo, ngải diệp mỗi vị 8g
Cách dùng: Các vị thuốc trên đem cho hết vào ấm. Đổ thêm 1 lít nước vào sắc trên lửa nhỏ. Khi lượng nước rút xuống còn phân nửa là được. Chia làm nhiều lần uống trong ngày, mỗi ngày chỉ sắc uống đúng 1 thang thuốc.
duong quy co tac dung gi
Đương quy khi mới thu hái về
Đương quy có tác dụng chữa táo bón, huyết nhiệt Chuẩn bị: đương quy, thục địa, đại hoàng, cam thảo, đào nhân mỗi vị 4g; sinh địa, thăng ma mỗi vị 3g và 1g hồng hoa.
Cách dùng: Các vị thuốc này cho hết vào ấm. Cho thêm 600ml nước vào sắc trên lửa nhỏ đến khi còn phân nửa thì tắt bếp. Chia lượng nước thuốc thu được làm 3 lần uống trong ngày, mỗi ngày chỉ dùng 1 thang và uống khi thuốc còn ấm.
Đương quy có tác dụng chữa nhức đầu, đau mình, mặt đỏ Chuẩn bị: đương quy, nhục quế mỗi vị 12g; 20g thục địa; chích thảo, can khương mỗi vị 8g.
Cách dùng: Vị thuốc trên đem cho tất cả vào ấm rồi đổ 800ml nước vào sắc trên lửa nhỏ. Tắt bếp khi lượng nước chỉ còn phân nửa, chia thuốc làm 2 lần uống và dùng 1 thang/ngày.
tac dung cua duong quy
Đương quy sắc thuốc
Tác dụng của đương quy chữa cảm mạo, phát sốt ở trẻ em Chuẩn bị: đương quy, sa sâm mỗi vị 4g; 8g sinh địa; 3g bạch thược; xuyên khung, tiêu khương mỗi vị 2g; 10 sợi cỏ bắc.
Cách dùng: Các vị thuốc nêu trên cho vào ấm sắc với khoảng 1 lít nước trên lửa nhỏ. Tắt bếp khi lượng nước thuốc còn khoảng 300ml. Chia làm 3 lần uống trong ngày trước mỗi bữa ăn, dùng 1 thang/ngày.
Tác dụng của đương quy giúp bổ máu Chuẩn bị: 8g đương quy, quế chi, sinh khương, đại táo mỗi vị 6g; 10g bạch thược; 50g đường phèn.
Cách dùng: Các vị thuốc đem cho vào ấm và tiến hành sắc cùng 800ml nước trên lửa nhỏ đến khi còn 300ml. Thêm đường phèn vào và chia làm 3 lần uống trong ngày, mỗi ngày dùng 1 thang với liều lượng như trên.
duong quy bo huyet
Đương quy bổ huyết
Tác dụng của đương quy chữa cao huyết áp Chuẩn bị: đương quy, sinh địa, đẳng sâm nam mỗi vị 10g; trắc bách, táo chua, phục linh, vỏ trai mỗi vị 16g; 6g vân mộc hương và 3g hoàng liên.
Cách dùng: Đem tất cả vị thuốc cho hết vào ấm rồi sắc trên lửa nhỏ với 1 lít nước. Lượng nước rút còn 300ml là được. Sắc xong, chia thuốc làm 3 lần uống trong 3 ngày. Trước khi uống, phải hâm lại cho ấm nóng rồi mới uống.
Tác dụng của đương quy chữa lao phổi Chuẩn bị: đương quy, sinh địa, nhân sâm, phục linh, bạ mơ, bạch thược, quả táo chua, cam thảo, dầu hạt mơ mỗi vị 1g và 5g ngũ v��� tử.
Cách dùng: Các vị thuốc cho vào ấm sắc trên lửa nhỏ với 600ml nước cho đến khi còn 200ml thì ngưng. Chia thuốc làm 2 lần uống trong ngày và sử dụng với liều lượng 1thang/ngày.
Xem thêm: CÂY NỞ NGÀY ĐẤT THẢO DƯỢC ĐIỀU TRỊ GOUT, ĐAU NHỨC XƯƠNG KHỚP HÀNG ĐẦU
cach dung duong quy
Cách dùng đương quy
Công dụng của đương quy hỗ trợ điều trị bệnh ung thư Chuẩn bị: đương quy, bạch thược, gừng mỗi vị 10g; vân mộc hương, đinh hương mỗi vị 4g; 16g phụ tử chế.
Cách dùng: Lấy phụ tử chế đem đun sôi riêng với nước trong 2 giờ rồi cho thêm nước sôi để được khoảng 600ml nước trong nồi. Sau đó, thêm các vị thuốc còn lại vào đun sôi trên lửa nhỏ trong 30 phút nữa. Tiến hành lọc qua rây để bỏ bã, lấy nước uống, chia uống 3 lần/ ngày, mỗi lần chỉ uống 100ml. Cần lưu ý, trước và sau khi uống thuốc 3 giờ không ăn những loại thức ăn chua và lạnh hoặc trứng gà.
Công dụng của đương quy chữa suy nhược tâm thần Chuẩn bị: đương qui, nhân sâm, bạch truật, phục linh, cam thảo, viễn chí, xà sang, phụ tử chế mỗi vị 6g; toan táo nhân, khởi tử, bạch chỉ mỗi vị 9g.
Cách dùng: Các vị thuốc đem cho hết vào ấm rồi cho 800ml vào sắc chung trên lửa nhỏ. Đun đến khi lượng thuốc chỉ còn khoảng 300ml thì tắt bếp. Sau đó, chia làm 3 lần uống trong ngày và mỗi ngày chỉ được sắc 1 thang uống.
Cách sử dụng đương quy cach su dung duong quy
Sâm đương quy thái lát phơi khô
Không chỉ kết hợp với các vị thuốc khác để tạo nên những bài thuốc chữa bệnh thần kỳ, đương quy còn có rất nhiều cách sử dụng hiệu quả mà không phải ai cũng biết.
Uống nước đương quy đúng cách không chỉ giúp tăng cường sức khỏe mà còn phòng ngừa được bệnh tật tấn công. Sau đây là một số cách dùng đương quy đơn giản rất được dân gian tin dùng và ưa chuộng, mời các bạn tham khảo:
Cách dùng đương quy ngâm rượu Chuẩn bị: 1kg đương quy khô, 10 lít rượu 40 độ, 1 bình thủy tinh lớn dùng ngâm rượu.
duong quy ngam ruou
Sâm đương quy ngâm rượu
Cách ngâm rượu sâm đương quy: rửa sạch đương quy với nước rồi để ráo. Sau đó cho đương quy vào bình rồi đổ hết lượng rượu đã chuẩn bị trên vào, đậy kín nắp bình, bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát.
Đợi sau 3 tháng là có thể mang ra để thưởng thức, rượu ngâm càng lâu thì dược tính sẽ càng cao, càng tốt cho sức khỏe. Lưu ý khi dùng chỉ nên dùng khoảng 25ml/ lần, mỗi ngày uống 2 lần. Uống rượu đương quy mỗi ngày có tác dụng bổ huyết, làm đẹp da, kích thích ăn ngon, tiêu hóa tốt.
Cách dùng đương quy ngâm mật ong Chuẩn bị: 1kg đương quy, 1,5 lít mật ong rừng nguyên chất, 1 hũ thủy tinh
duong quy ngam mat ong
Đương quy ngâm mật ong
Cách ngâm: rửa sạch đương quy dưới vòi nước mạnh để loại bỏ bụi bẩn, để ráo nước. Sau đó cho đương quy vào hũ thủy tinh rồi đổ từ từ mật ong vào. Tiếp đến, khuấy đương quy lên để mật ong ngấm vào dược liệu rồi đậy kín nắp hũ lại.
Sau 1 tuần là có thể mang ra dùng. Khi dùng, lấy 1 lượng nhỏ mật ong và đương quy ra pha với nước ấm rồi dùng.
Đương quy nấu món gì ngon? Bạn đã bao giờ dùng đương qui làm nguyên liệu cho món ăn của mình chưa? Nếu chưa thì hãy dùng thử ngay nhé. Kết hợp đương quy trong nấu ăn l�� một trong những cách bồi bổ sức khỏe vô cùng hiệu quả rất được nhiều người ưa chuộng.
Thông thường, người ta sẽ dùng đương quy để chế biến nhiều món ăn bổ dưỡng như canh tim heo hầm đương quy, đuôi heo hầm đương quy, cá chép hầm đương quy, đặc biệt là món gà ác hấp cách thủy đương quy vô cùng thơm ngon và nhiều món ăn tuyệt vời khác nữa.
duong quy nau gi
Cách dùng đương quy nấu xương
Đối tượng nên sử dụng đương quy Người bị huyết áp thấp Phụ nữ bị rối loạn kinh nguyệt, đau bụng kinh Người bị lao phổi Người bị thiếu máu, da xanh, tái Người bị cao huyết áp Đối tượng khí và huyết đều kém, người mệt mỏi Trẻ em bị cảm mạo phát sốt Người gầy yếu, kém ăn, kém ngủ Người bị táo bón Người bị tiêu hóa kém do tỳ hư Phụ nữ sau khi sinh Người phong tê thấp, đau nhức xương khớp sam duong quy
Sâm đương quy
Ngoài ra, đương qui là một loại thảo dược giúp bồi bổ sức khỏe rất tốt cho nên người bình thường cũng có thể dùng đương quy mỗi ngày bằng cách kết hợp vào trong các món ăn để ngăn ngừa bệnh tật và tăng cường sức khỏe.
Lưu ý khi sử dụng đương quy Hạn chế dùng đương quy cho phụ nữ đang mang thai Dùng đương quy đúng, đủ liều lượng, không lạm dụng thuốc, mỗi ngày chỉ nên dùng từ 10-15g Tránh dùng đương quy với thuốc chống đông máu Không dùng đương quy cho các trường hợp tiêu chảy, bệnh nhân tiểu đường, người bị rối loạn máu hay viêm loét đường tiêu hóa. cu duong quy
Củ đương quy
Đương quy giá bao nhiêu? Hiện nay, trên thị trường có rất nhiều địa chỉ bán đương quy với nhiều mức giá khác nhau, thậm chí có nơi bán với mức giá trên trời nhằm kiếm lợi mặc dù sản phẩm rất kém chất lượng.
Để mua được sản phẩm đúng giá mà chất lượng lại tốt thì bạn nên chọn những địa chỉ web của các nhà thuốc y học cổ truyền uy tín. caythuoc.vn thuộc Thảo dược An Quốc Thái đang bán đương quy với giá vô cùng hấp dẫn là 450,000 đồng/ kg và rất được nhiều khách hàng tin dùng.
Mua đương quy ở đâu uy tín nhất? Hiện tại, caythuoc.vn thuộc Thảo dược An Quốc Thái đang cung cấp tất cả các loại thảo dược, trong đó có đương quy. Sản phẩm đảm bảo chất lượng cao, đạt chuẩn, có nguồn gốc rõ ràng và được thu hái từ vùng núi cao Tây Bắc nên dược tính rất tốt. Khách hàng có thể hoàn toàn an tâm khi đặt hàng tại caythuoc.vn.
Ngoài ra, nếu bạn muốn kết hợp đương quy với các vị thuốc khác để gia tăng thêm công hiệu thì có thể liên hệ với chúng tôi theo thông tin dưới đây để nhận được sự tư vấn nhiệt tình nhất nhé.
Thảo dược An Quốc Thái là cơ sở bán đương quy uy tín tại TP HCM, chúng tôi có hơn  30 năm trong nghề kinh doanh dược liệu.
Địa chỉ:     62/1/28 Trương Công Định, Phường 14, Quận Tân Bình, TP HCM
Liên hệ đặt hàng :  0902 743 250 (Mobi)- 0961 744 414 (Viettel)
Cảm ơn bạn đọc đã xem bài viết: "Đương quy là thảo dược có tác dụng gì, cách dùng, liều dùng thế nào?". Hy vọng, bài viết trên đã giúp bạn hiểu hơn đương quy có tác dụng gì, cũng như cách dùng ngâm rượu, giá bán, địa chỉ mua uy tín.
Cảm ơn các bạn đã theo dõi bài viết!
Chia sẻ: Lưu ý : Kết quả có thể da dạng tùy theo thể trạng và cơ chế tập luyện của mỗi người.
=> CAM KẾT: CHÚNG TÔI SẼ HOÀN LẠI 100% SỐ TIỀN NẾU SẢN PHẨM KHÔNG ĐÚNG CHẤT LƯỢNG
Thông báo nghỉ tết âm lịch:
Nghỉ têt từ ngày 27-12(âm lịch) đến ngày 7-1(âm lịch)
Ngày làm việc lại từ 8h đế 17h30 ngày 19-2-2021 từ ngày 8-1-2021 (âm lịch)
THÔNG TIN LIÊN HỆ
THẢO DƯỢC AN QUỐC THÁI
Chi nhánh:  62/1/28 Trương Công Định, Phường 14 Quận Tân Bình, TP HCM
Liên hệ mua : 0926456456 (Viettel)  -  0902743250 (mobi)  -  0927002002 (Vnmb)
tại sao
Xem thêm: TÁO NHÂN: CÔNG DỤNG VÀ CÁCH DÙNG, BÀI THUỐC HAY CỦA TOAN TÁO NHÂN.
0 notes
ribosome-papers · 5 years
Text
Local translation of yeast ERG4 mRNA at the endoplasmic reticulum requires the brefeldin A resistance protein Bfr1.
Pubmed: http://dlvr.it/RC6VrP
0 notes
tumimmtxpapers · 5 years
Text
Bystander responses impact accurate detection of murine and human antigen-specific CD8 T cells.
Related Articles Bystander responses impact accurate detection of murine and human antigen-specific CD8 T cells. J Clin Invest. 2019 Jun 20;130: Authors: Martin MD, Jensen IJ, Ishizuka AS, Lefebvre M, Shan Q, Xue HH, Harty JT, Seder RA, Badovinac VP Abstract Induction of memory CD8 T cells is important for controlling infections such as malaria HIV/AIDS, and for cancer immunotherapy. Accurate assessment of antigen (Ag)-specific CD8 T-cells is critical for vaccine optimization and defining correlates of protection. However, conditions for determining Ag-specific CD8 T-cell responses ex-vivo using ICS may be variable, especially in humans with complex antigens. Here, we used an attenuated whole parasite malaria vaccine model in humans and various experimental infections in mice to show that the duration of antigenic stimulation and timing of brefeldin A (BFA) addition influences the magnitude of Ag-specific and bystander T cell responses. Indeed, following immunization with an attenuated whole sporozoite malaria vaccine in humans, significantly higher numbers of IFN-γ producing memory CD8 T-cells comprised of antigen specific and bystander responses were detected by increasing the duration of Ag-stimulation prior to addition of BFA. Mechanistic analyses of virus-specific CD8 T-cells in mice revealed that the increase in IFNg producing CD8 T-cells was due to bystander activation of Ag-experienced memory CD8 T-cells, and correlated with the proportion of Ag-experienced CD8 T-cells in the stimulated populations. Incubation with anti-cytokine antibodies (ex. IL-12) improved accuracy in detecting bona-fide memory CD8 T-cell responses suggesting this as the mechanism for the bystander activation. These data have important implications for accurate assessment of immune responses generated by vaccines intended to elicit protective memory CD8 T-cells. PMID: 31219804 [PubMed - in process] http://dlvr.it/R71jV0
0 notes
facsanalysis-blog · 6 years
Text
How Is Intracellular Staining Protocol Used?
Flow Cytometry can use to deduct or analyze diverse intracellular Staining Protocol along with phosphorylated signaling proteins and cytokines. In addition, the Cytokines and other secreted protocols can deduct by way of flow Cytometry in activated cells with the help of secretion inhibitors, which comprise brefeldin A etc. this help to secure the export of newly synthesized proteins.
For experimental solutions with stimulation durations of maximum 6-7 hours, the secretion inhibitor may be saved throughout the entire incubation duration. In a case, the duration of stimulation is maximum than 7 hours then the secretion inhibitor requires to be brought for most required the last three hours of the incubation. In addition, there are numerous variables that require to be optimized for individual FAC experiments which comprise antibody incubation time and more. This permeabilization solution permits the FAC antibody to bypass through the plasma membrane into the cell interior while endowing the morphological traits used to sort the cells.
Lets’ find out the material needs for Intracellular Staining Protocol Procedure:
FACS™ Tubes
Pipette Tips and Pipettes
Centrifuge
Vortex
Moreover, the names of commonly used detergents include- Triton® X-a hundred, saponin, or Tween® 20. Reagents which are required for Staining Intracellular Procedure:
Flow Cytometry Fixation Buffer
Detection Antibodies
Flow Cytometry Fixation/Permeabilization Buffer I
PBS (1X): 0.137 M NaCl, 0.05 M NaH2PO4, pH 7.4 or Hank’s Balanced Salt Solution (HBSS; 1X)
Isotype Control Antibodies
Lets’ find out the FACS Protocols Intracellular procedure:
In the beginning, make sure to harvest the cells first. After this, wash these 2 times with 2 mL of PBS or HBSS and then decanting buffer from pelleted cells.
After this step, aliquot up to 1 x 106 cells/100 μL into FACS tubes and integrate .5 mL of cold Flow Cytometry Fixation Buffer and vortex. Once completed this, make sure to keep this in the room temperature for at least 15 minutes. In addition, during this step, centrifuge cells and decant the Fixation Buffer and then make sure to wash the cells 2 times again either with HBSS or PBS.
Now add 10 μL of conjugated antibody and vortex and then again keep these cells at room temperature in the dark for at least 30 minutes.
Once completed all these steps, you will come to the last step. In this, again clean the cells 2 times with Flow Cytometry Permeabilization. You may also was buffer I as did in the last step.
In addition, it may be noted that in any case, if an unconjugated primary antibody turned into used, incubation with the secondary antibody requires. For this, dilute the secondary antibody in FAC Permeabilization or Wash Buffer I, beginning with the concentration cautioned in the product datasheet. Then again keep it for 30 minutes within the dark and as did in step 3.
Booster antibody and ELISA experts is a remarkable and destination which provide accurate and simple Intracellular Staining Protocol. To get more details on FACS Staining Protocol, kindly click on this link https://www.facs-analysis.com/.
0 notes
rnomics · 8 years
Text
Viruses, Vol. 9, Pages 5: Mx Is Not Responsible for the Antiviral Activity of Interferon-α against Japanese Encephalitis Virus
Mx proteins are interferon (IFN)-induced dynamin-like GTPases that are present in all vertebrates and inhibit the replication of myriad viruses. However, the role Mx proteins play in IFN-mediated suppression of Japanese encephalitis virus (JEV) infection is unknown. In this study, we set out to investigate the effects of Mx1 and Mx2 expression on the interferon-α (IFNα) restriction of JEV replication. To evaluate whether the inhibitory activity of IFNα on JEV is dependent on Mx1 or Mx2, we knocked down Mx1 or Mx2 with #siRNA in IFNα-treated PK-15 cells and BHK-21 cells, then challenged them with JEV; the production of progeny virus was assessed by plaque assay, RT-qPCR, and Western blotting. Our results demonstrated that depletion of Mx1 or Mx2 did not affect JEV restriction imposed by IFNα, although these two proteins were knocked down 66% and 79%, respectively. Accordingly, expression of exogenous Mx1 or Mx2 did not change the inhibitory activity of IFNα to JEV. In addition, even though virus-induced membranes were damaged by Brefeldin A (BFA), overexpressing porcine Mx1 or Mx2 did not inhibit JEV proliferation. We found that BFA inhibited JEV replication, not maturation, suggesting that BFA could be developed into a novel antiviral reagent. Collectively, our findings demonstrate that IFNα inhibits JEV infection by Mx-independent pathways. http://bit.ly/2jyWJKc #MDPI
0 notes
bitesizebioworld · 7 years
Text
Brefeldin A v Monensin: How to Hunt for Proteins
 As any good biologist knows, one of the easiest ways to determine if a cell is functionally active is the production and secretion of proteins in response to a stimulus. In many circumstances, the quantity of the secreted protein, and thus the level of cellular activation can be assessed by ELISA. However, if you are…
The post Brefeldin A v Monensin: How to Hunt for Proteins appeared first on Bitesize Bio.
0 notes
neurogenpapers · 8 years
Text
Luman contributes to brefeldin A-induced prion protein gene expression by interacting with the ERSE26 element.
PubMed: Luman contributes to brefeldin A-induced prion protein gene expression by interacting with the ERSE26 element. Sci Rep. 2017 Feb 13;7:42285 Authors: Déry MA, LeBlanc AC Abstract The cellular prion protein (PrP) is essential for transmissible prion diseases, but its exact physiological function remains unclear. Better understanding the regulation of the human prion protein gene (PRNP) expression can provide insight into this elusive function. Spliced XBP1 (sXBP1) was recently shown to mediate endoplasmic reticulum (ER) stress-induced PRNP expression. In this manuscript, we identify Luman, a ubiquitous, non-canonical unfolded protein response (UPR), as a novel regulator of ER stress-induced PRNP expression. Luman activity was transcriptionally and proteolytically activated by the ER stressing drug brefeldin A (BFA) in human neurons, astrocytes, and breast cancer MCF-7 cells. Over-expression of active cleaved Luman (ΔLuman) increased PrP levels, while siRNA-mediated Luman silencing decreased BFA-induced PRNP expression. Site-directed mutagenesis and chromatin immunoprecipitation demonstrated that ΔLuman regulates PRNP expression by interacting with the ER stress response element 26 (ERSE26). Co-over-expression and siRNA-mediated silencing experiments showed that sXBP1 and ΔLuman both up-regulate ER stress-induced PRNP expression. Attempts to understand the function of PRNP up-regulation by Luman excluded a role in atorvastatin-induced neuritogenesis, ER-associated degradation, or proteasomal inhibition-induced cell death. Overall, these results refine our understanding of ER stress-induced PRNP expression and function. PMID: 28205568 [PubMed - in process] http://dlvr.it/NPh5BB
0 notes
epigen-papers · 8 years
Text
Luman contributes to brefeldin A-induced prion protein gene expression by interacting with the ERSE26 element.
Pubmed: http://dlvr.it/NPV7Qc
0 notes